Как проводится лабораторная диагностика гепатита C

Добрый день, уважаемые читатели. Сегодня я собираюсь рассказать о диагностике гепатита С. Тема серьезная, т. к. выявить вирус на ранних этапах тяжело. Из-за отсутствия болевых ощущений человек не догадывается о заболевании, в то время как оно медленно прогрессирует. Итак, поговорим о том, какие анализы следует сдавать на гепатит С и как их расшифровать, какие дополнительные методы диагностики необходимы для постановки диагноза.

Картинка-анонс к статье Как проводится лабораторная диагностика гепатита C

Методика диагностики гепатита С универсальна, разницы в рекомендациях Минздрава и европейских протоколах нет. Диагностический процесс начинается с опроса пациента о клинических симптомах болезни, особенностях ее развития, а также об анамнезе жизни. Осмотрев пациента и поняв, что вероятность заражения высока, я определяю спектр инструментальных методов и лабораторных анализов необходимых для подтверждения диагноза. Обычно это:

  1. биохимический и общеклинический анализ крови;
  2. иммуноферментное исследование – первостепенное в диагностике болезни;
  3. ПЦР – подтверждающий анализ на гепатит С;
  4. УЗИ;
  5. биопсия печени.
Сразу немного о результатах. Положительный анализ на гепатит С означает, что у вас присутствует вирус и вы, скорее всего, больны. Если результат отрицательный, то все в порядке – вы здоровы.

Подготовка к исследованию

Теперь нам важно получить достоверные результаты. А для этого необходимо соблюдать рекомендации по подготовке к обследованию.

  1. Все процедуры и забор биологического материала (в том числе и анализы крови) осуществляются на «голодный» желудок. По нормативным документам период отказа от еды должен быть не менее 8 часов. Поэтому своим пациентам я рекомендую приходить сутра и без завтрака.
  2. За 3 дня до анализа прекратить употребление алкоголя, ограничить тяжелую физическую нагрузку и отказаться от физиотерапевтических процедур.
  3. Я обязательно спрашиваю пациента о принимаемых лекарственных средствах, так как некоторые из них влияют на действие реактивов. Это в первую очередь касается антикоагулянтов, например, гепарина. Из-за этого мы часто корректируем график процедур.
  4. Своим пациентам я настоятельно рекомендую придерживаться диетического питания в течение 3-5 дней перед исследованием.

Сразу отвечу на распространенный вопрос. Беременность и грудное вскармливание никак не влияют на результаты анализов на гепатит С. Специфика этого периода заключается в том, что организм находится под нагрузкой, а это сказывается на процедуре лечения, но не диагностики.

Начинаем с биохимического анализа крови

Общий анализ крови при гепатите С (гемоглобин, лейкоциты, СОЭ, эритроциты) не дает представления о состоянии печени и не способен подтвердить болезнь. Информативным считается биохимический. Он включает исследование нескольких показателей:

  • трансаминаз;
  • билирубина;
  • гамма-глютамилтранспептидазы (ГГТ).

Конечно, показателей может быть и больше (глюкоза, альбумин), однако изменения касаются вышеперечисленных. Итак, на что нужно смотреть:

  1. Повышенный уровень печеночных ферментов (аланин-, аспартатаминотрансферазы) является косвенным признаком вирусного поражения печени. Они относятся к внутриклеточным компонентам, которые после деструкции гепатоцитов выходят наружу.
  2. Увеличение концентрации трансаминаз в крови наблюдается спустя 1-2 месяца после проникновения вируса в организм. В последующем их содержание может нормализоваться, поэтому крайне важно выдерживать сроки сдачи анализов. Этот факт затрудняет диагностику, поэтому нужно смотреть комплексно на все параметры.
  3. Для гепатита С характерно большее увеличение АЛТ в сравнении с АСТ. С диагностической целью врач рассчитывает индекс де Ритиса (отношение аланинаминотрансферазы к аспартатаминотрансферазе), что позволяет оценить степень поражения печени. Ферменты нарастают по мере развития болезни и разрушения клеток под действием возбудителей. Со временем они могут уменьшаться, что является плохим прогностическим признаком. В норме верхняя граница АЛТ не должна превышать 0,68, а АСТ – 0,45.
  4. На поздних стадиях гепатита С, при цирротическом перерождении тканей органа, наблюдается повышение гамма-глютамилтранспептидазы (ГГТ). В нормальном состоянии верхняя граница показателя находится на уровне 42 Ед/л для слабого пола и 71 для мужчин.

Почему так важен билирубин

В биохимии указывается общее и фракционное содержащие билирубина. Его трансформация и подготовка к выведению осуществляет в гепатоцитах (клетках печени), разрушение которых сопровождается увеличением показателя в анализах. В крови нарастает как прямая, так и несвязанная формы молекул.

Максимальные значения наблюдаются в острую стадию гепатита, когда беспокоит желтушность кожных покровов, изменение цвета стула и болезненные ощущения в области печени. Норма билирубина составляет 20 мкмоль/л. При этом большая его часть должна быть представлена непрямой фракцией.

Определение специфических антител

После того, как мы просмотрели данные биохимического анализа крови, нужно подтвердить диагноз. Для этого необходимо определить наличие специфических антител (иммуноглобулинов IgG и IgM) в организме. Их поиск осуществляется с помощью иммуноферментного анализа (ИФА), в ходе которого определяется их уровень.

Лабораторная диагностика гепатита С широко используется в качестве скрининга, то есть массового обследования людей и выявления носителей HCV. Ее эффективность достигает 95%, но есть случаи получения ложного результата. Дело в том, что антитела против возбудителя начинают вырабатываться в крови только спустя несколько недель после заражения. Для подтверждения диагноза нужно запустить полимеразную цепную реакцию и отследить результаты.

В ходе исследования на гепатит С оценивается уровень иммуноглобулина.

  1. IgM. Выявляется спустя 1-1,5 месяца после проникновения возбудителя в организм. Через полгода уровень иммуноглобулинов снижается к минимуму и повышается только при условии повторного инфицирования HCV с другим генотипом.
  2. IgG. Проявляется на третьем месяце заражения и сохраняется на протяжении всего заболевания с небольшими колебаниями.

Ниже представлена таблица с расшифровкой анализов на гепатит С.

Показатель Трактовка результата
IgM(+), IgG(+), РНК(+) с высокой вирусной нагрузкой Острое заболевание
IgM(-), IgG(+), РНК(-/+) с низкой концентрацией возбудителей в крови) Хроническое (ремиссия), при обострении появляются IgM
IgM(-), IgG(+), РНК(-) Выздоровление
IgM(-), IgG(-), РНК(+) Ранний инкубационный период

Генотипирование

Следующим этапом обследования может стать генотипирование (проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) с целью определения генотипа возбудителя). Именно тут мы выявляем маркеры гепатита С. Оно необходимо в следующих случаях:

  1. при положительном или сомнительном ответе ИФА;
  2. с целью верификации диагноза;
  3. для диагностики микст-инфекции;
  4. для установления вирусной нагрузки;
  5. для определения стадии гепатита С.

Определение генотипа позволяет подобрать эффективные препараты для лечения конкретного клинического случая и проследить динамику изменений. Эта методика является наиболее точной из рассматриваемых.

  • Она позволяет обнаружить даже небольшую концентрацию вирусов. Это особенно важно для диагностики болезни на доклинической стадии.
  • Может подтвердить заболевание на основе выявленного генетического набора вируса.
  • Быстро провести диагностику в случае необходимости.
  • Она универсальна. Это лабораторное исследование дает возможность обнаружить как РНК-, так и ДНК-содержащие возбудители.

Существует два этапа ПЦР - качественный и количественный анализы.

  1. Первая ступень диагностики позволяет установить факт присутствия патогенного агента в организме человека и подтвердить гепатит С. Ответ может звучать следующим образом: «отрицательный результат» или «вирус не обнаружен», что является нормой.
  2. Второй этап полимеразной цепной реакции предполагает подсчет вирусов в фиксированном объеме материала. Количественное исследование помогает установить стадию болезни и оценить степень заразности носителя HCV. Она напрямую зависит от концентрации вирусов в крови. При высоких показателях даже небольшой объем биологического материала может стать серьезной угрозой для здоровья окружающих людей.

В зависимости от лаборатории ответ может выдаваться в различных единицах (МЕ/мл или копии/мл). Существуют некоторые погрешности в подсчетах, однако на конечный результат исследования они не оказывают влияния. Расшифровка анализа на гепатит С по ПЦР приведена ниже в таблице.

Количественный ответ Трактовка результатов
400 МЕ/мл Инфекционный агент не найден.
Меньше 1,5*10^3 Концентрация возбудителя настолько маленькая, что не улавливается тест-системами.
< 4*10^6 Вирус выявлен. Прогноз для жизни благоприятный.
Больше 4*10^6 Высокая концентрация инфекционных агентов.
От 2*10^8 Максимальная вирусная нагрузка. Даже небольшой объем крови может стать причиной заражения здорового человека.

ПЦР проводится после того, как пациент уже сдал анализы крови, и врачу необходимо подтвердить диагноз гепатита С. Затем пациент повторно сдает кровь через 4 и 12 недель с момента начала лечения. Это требуется для оценки динамики заболевания. Повторно ПЦР назначается через 6 месяцев. Это дает возможность отследить эффективность принимаемых медикаментов. По окончании лечения ПЦР сдается еще раз для подтверждения выздоровления.

Если для терапии и постановки диагноза ПЦР недостаточно - существуют ультрачувствительные неинвазивными методики, которые для исследования используют слюну. Они позволяют избежать забора крови, но дают возможность установить лишь факт присутствия возбудителя в биологическом материале без его количественного подсчета.

Инструментальная диагностика гепатита С

Итак, последним этапом в диагностике гепатита С является УЗИ. Я назначаю его параллельно с ПЦР, когда анализы крови уже выдают косвенные признаки заболевания. Оно позволяет осмотреть печень и прилегающее органы, оценить их размер, очертания, структуру и визуализировать дополнительные образования. Обычно на начальной стадии болезни специфические изменения отсутствуют, точнее говоря, они не улавливаются ультразвуковыми волнами.

Более подробно про УЗИ печени я писала в этой статье.

Достоверность результатов

Ложноположительный результат ИФА может получиться даже у человека, у которого нет гепатита С. К причинам такого ответа относятся аутоиммунные болезни, онкологические новообразования, тяжелые инфекционные патологии и период беременности.

Получив сомнительный результат, врач должен назначить либо повторное исследование в другой лаборатории, или дополнительный анализ на гепатит С. Важно помнить, что на ответ диагностики могут повлиять:

  • неправильная подготовка к сдаче крови со стороны пациента;
  • некачественный забор биологического материала;
  • нарушение правил по его хранению и транспортировке;
  • низкая квалификация работников лаборатории, вследствие чего может не соблюдаться технологический процесс.
Причины ошибочных результатов анализов

Подытожим

Вирусная нагрузка зависит от стадии заболевания. Острая фаза характеризуется нарастанием концентрации инфекционных возбудителей в крови, что сопровождается возникновением клинической симптоматики.

В этот период также повышается скорость разрушения гепатоцитов, вследствие чего в биохимии можно увидеть рост печеночных ферментов (АЛТ, АСТ). При хроническом течении изменения наблюдаются с показателем ГГТ. Его увеличение косвенно указывает на цирротическое перерождение тканей органа.

Для более тщательного исследования требуется биопсия печени. Забор материала осуществляется под анестезией, после чего ткань подвергается гистологическому анализу. По его результатам врач судит о степени поражения печени и стадии цирроза.

Все результаты лабораторных и инструментальных исследований необходимо анализировать совместно с клиническими симптомами. Только так врач сможет правильно поставить диагноз и определить дальнейшую лечебную тактику.

Автор: Галактионова Светлана

Совет от гепатологов